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IPTG | 367-93-1

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中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
參數(shù)CAS號:367-93-1
產品參數(shù)
CAS號:367-93-1
儲存方式:推薦2-8℃存儲。
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1、中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

2、英文名稱:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化學名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、級別:化學試劑級

7、貨號:    


一、 理化性質

1、 結構:

2、性狀:白色晶體粉末

3、純度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔點:110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 運輸與保存

推薦2-8℃存儲。

三、 使用注意事項

1、含有 IPTG 的培養(yǎng)基 4℃避光保存,須在 1 周內使用。

2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3、本產品僅作科研用途。

 

四、 應用

1、儲存液配制

①稱取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲存液;

②用5-10 mL去離子水潤濕0.22μm濾膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

 

2、 藍白斑篩選

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導物質?;谶@個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時,如果在平板培養(yǎng)基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

①高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到 50℃左右。

②每毫升培養(yǎng)基內加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達到 1 mM);

③加入適量抗生素;

④混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細菌于 37℃過夜培養(yǎng)。

(2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

①于無菌超凈工作臺制備平板(如LB瓊脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準備好的平板上;

備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長)。接種細菌于 37℃過夜培養(yǎng)直到菌落形成。

④根據(jù)長出菌體的藍白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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CAS號:367-93-1
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1、中文名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)

2、英文名稱:Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化學名稱:異丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式:C9H18O5S

5、CAS:367-93-1

6、級別:化學試劑級

7、貨號:    


一、 理化性質

1、 結構:

2、性狀:白色晶體粉末

3、純度:≥99%

4、分子量:238.3

5、熔點:110℃-114℃

6、比旋光度:-32°

 

二、 運輸與保存

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三、 使用注意事項

1、含有 IPTG 的培養(yǎng)基 4℃避光保存,須在 1 周內使用。

2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3、本產品僅作科研用途。

 

四、 應用

1、儲存液配制

①稱取 0.238 g IPTG;加入10 mL去離子水充分溶解,配制 0.1 M 的儲存液;

②用5-10 mL去離子水潤濕0.22μm濾膜;

③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌,分裝成 1 mL,-20℃冷凍保存。

 

2、 藍白斑篩選

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導物質?;谶@個特性,當pUC系列的載體DNA(或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時,如果在平板培養(yǎng)基中加入X-gal和IPTG,由于β-半乳糖苷酶的α-互補性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。

(1) X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

①高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到 50℃左右。

②每毫升培養(yǎng)基內加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG(使其終濃度達到 1 mM);

③加入適量抗生素;

④混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細菌于 37℃過夜培養(yǎng)。

(2)X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

①于無菌超凈工作臺制備平板(如LB瓊脂板);

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合,均勻地涂布于準備好的平板上;

備注:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

③37℃孵育直至所有液體被吸收(30 min 或更長)。接種細菌于 37℃過夜培養(yǎng)直到菌落形成。

④根據(jù)長出菌體的藍白色,方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。


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